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| 本發明公開了一種天然高效純生物活性物質抗雞傳染性法氏囊病毒轉移因子的制備方法。本發明按照以下步驟進行：將雞傳染性法氏囊病毒接種于１０天齡雞胚尿囊液制備病毒抗原；提取病毒抗原；用上述提取的病毒抗原免疫豬；從免疫豬中提取抗雞傳染性法氏囊病毒轉移因子。因此使用本發明的轉移因子可以起到預防雞傳染性法氏囊病毒感染、能夠保護正常機體細胞免受雞傳染性法氏囊病毒侵害的作用，從而降低發病率。 |
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一種抗雞傳染性法氏囊病毒轉移因子的制備方法
一種抗雞傳染性法氏囊病毒轉移因子的制備方法，其特征在于，按照以下步驟進行： （１）制備病毒抗原：將雞傳染性法氏囊病毒接種于１０天齡雞胚尿囊液，３３℃下４８－７２小時，取雞胚尿囊液，裝厚壁小瓶子內，超聲打碎，５０００ｒｐｍ離心２０分鐘，棄去沉渣留上清； （２）提取病毒抗原：取離心上清，然后不連續梯度密度離心純化提取病毒抗原；將病毒抗原離心后，取上清液裝入以１５％、３０％、４５％及６０％的蔗糖制備的不連續梯度密度離心管，超速離心，１６５０００轉／分３小時，根據雞傳染性法氏囊病毒的分子量確定雞傳染性法氏囊病毒所在離心管位置，吸出備用； （３）用上述提取的病毒抗原免疫豬：挑選健康免疫豬，取制備的病毒抗原，用上述提取病毒抗原皮下多點注射免疫豬，共免疫３－４次，前兩次分別以完全佛氏佐劑及不完全佛氏佐劑混合抗原，以高速組織勻漿機打勻，在動物皮內或皮下多點注射免疫，第３次和第４次后在動物的肌肉或靜脈注射，每次免疫間隔一周，最后一次免疫７－１０天后取動物靜脈血，以免疫熒光方法或ＥＬＩＳＡ方法檢測上述病毒的特異性抗體效價，出現病毒特異性免疫效價后，宰殺動物，取脾臟和胸腺于冰上，轉移至－２０℃保存，備用； （４）從免疫豬中提取抗雞傳染性法氏囊病毒轉移因子： ①原材料的制備及預處理：將上述接種病毒免疫豬的脾及淋巴結組織，用冷三蒸水洗凈豬脾，去其表面的筋膜、脂肪等組織，再滅菌生理鹽水反復沖洗； ②破碎：將洗干凈的豬脾臟剪碎，加入２倍體積的冷生理鹽水，在冰凍的條件下用高速組織搗碎機以１０００ｒ／ｍｉｎ搗碎３次，每次３ｍｉｎ，制得勻漿液； ③凍融：將勻漿液置于－８０℃快速冷凍，水浴３０℃中融化，交替凍融４－６次，每次融化后均以組織勻漿機高速勻漿粉碎； ④提取：加入３倍體積的冷生理鹽水，置于冰凍離心機于５℃以４０００ｒ／ｍｉｎ離心３０分鐘，取上層血紅色液體，再用Ｇ２砂心漏斗過濾，取濾液； ⑤超濾：將上述濾液用截流值為６０００道爾頓的中空纖維超濾膜加壓超濾，濾液為分子量小于６０００道爾頓的轉移因子； ⑥除菌：將超濾得到的濾液用孔徑為０．２２ｕｍ的濾膜加壓過濾除菌； ⑦分裝：４℃密封保存，即得所述的抗雞傳染性法氏囊病毒轉移因子提取液。
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| 專利號: |
200810053543 |
| 申請日: |
2008年6月17日 |
| 公開/公告日: |
2008年10月29日 |
| 授權公告日: |
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| 申請人/專利權人: |
天津生機集團股份有限公司 |
| 國家/省市: |
天津(12) |
| 郵編: |
301609 |
| 發明/設計人: |
田杏芳、王連民 |
| 代理人: |
閆俊芬 |
| 專利代理機構: |
天津市金信專利事務所(12107) |
| 專利代理機構地址: |
天津市河西區友誼路西園道1號(300061) |
| 專利類型: |
發明 |
| 公開號: |
101293914 |
| 公告日: |
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| 授權日: |
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| 公告號: |
000000000 |
| 優先權: |
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| 審批歷史: |
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| 附圖數: |
0 |
| 頁數: |
7 |
| 權利要求項數: |
1 |
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